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Silberfärbung

Verschiedene Reinigungsstufen/Verdünnungen der Alkohol-Dehydrogenase getrennt in einem SDS-Gel und mit der Silberfärbung angefärbt.

Die Silberfärbung ist ein Verfahren zum Anfärben von Proteinen nach einer Elektrophorese. Das Verfahren ähnelt in den einzelnen Schritten dem Verfahren der Entwicklung aus der Fotografie.

Zunächst werden die Proteine im Gel fixiert. Die verwendete Fixierlösung enthält: 10 % Eisessig, 30 % Ethanol. Durch die Behandlung mit dieser Lösung werden die Proteine im Gel denaturiert und fallen somit aus. Dadurch wird ein weiteres Wandern der Proteine im Gel verhindert. Nach mehrmaligem Waschen mit H₂O wird das Gel in einer Silbernitratlösung inkubiert. Dadurch lagern sich Ag+-Ionen an die Proteine an. Überschüssige Ionen werden mit Wasser abgewaschen.

Abschließend folgt der Entwicklungsschritt: Durch Zugabe von alkalischem Formaldehyd werden die Ag+-Ionen zu elementarem Ag reduziert. Dieses färbt die Stellen, an denen Proteine vorhanden sind schwarz.